(一)1/15mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution，PBS)}h&Nw
甲液：1/15mol/L Na2HPO4溶液~]?{f`
Na2HPO4 9.465g:2J5
蒸馏水 加至1000ml\h)RK~
乙液：l/15mol/L KH2PO4溶液v
KH2P04 9.07g\
蒸馏水 加至1000m1ZgX
分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液gNzd
(二)0.3％台盼兰染液W"={1J
称取台盼兰(Trypan blue)粉0.3克，溶于100ml生理盐水中，加热使之完全溶解，用滤纸过滤除渣，装入瓶内室温保存。;/*YNq
(三)0.5％酚红指示剂MI]sf
酚红 0.5g #yKx
0.1N(0.4％)NaOH 15mlELy&
双蒸水 85mlh_C4
将0.5克酚红置研钵中，缓漫滴加0.1NNaOH溶液边加边磨，并不断吸出已溶解的酚红液，直至全部溶解，然后加入85ml双蒸水，颜色为深红，经粗滤纸过滤后使用，室温保存。 ;e~U
(四)5.6％NaHCO3溶液HL9.u@
称NaHCO35.6克，溶于100ml蒸馏水中，室温保存即可(如需要也可10磅15分钟高压灭菌，4℃冰箱保存)[BS[VG
(五)10μg／ml秋水仙素dhvi
秋水仙素 lOmgIx
生理盐水 100mlk K)p+
装入茶色瓶中，为贮备液，4℃冰箱中保存。甩时取贮备液1ml加生理盐水9ml即可。rXCH
(六)0.4％KCl-0.4％柠檬酸钠低渗液/75spL
将0.4％KCl和0.4％柠檬酸钠两液等量混合即可，室温保存。U>K9
(七)2％柠檬酸钠.y
称取柠檬酸钠2克，加100ml双蒸水即可，室温保存。]@KO
（八）0.2％次甲基兰染液.z^{)
称次甲基兰(Methylene blue)0.2克，加蒸馏水100ml，室温保存。K{;rm3
(九)0.5％醋酸洋红(Aceio Carmine)染液/vk4 )
洋红 lgd^osrQ
醋酸 90ml:$
蒸馏水 110ml'
将90ml醋酸加入110ml蒸馏水煮沸，然后将火焰移去，立即加入1克洋红，使之迅速冷却过滤，加饱和氢氧化铁(媒染剂)水溶液数滴，直到呈葡萄酒色。室温保存。加铁使洋红沉淀于组织而着色。此染液室温存放时间越长效果越好，室温保存。I
(十)1％甲苯胺兰(Toluidine blue)t?R
称取甲苯胺兰1克，加蒸馏水lOOml。6{ix
(十一)1/3000中性红染液-4<
取中性红(Neutral red)0.1克，加蒸馏水300ml。室温保存。Zr
(十二)Giemsa染液NoH
1．贮备液,sba
Giemsa粉 1gvEXCDK
纯甘油 66ml L~Y[3A
甲醇 66mlj
先将Giemsa粉置于研钵中加少量甘油，充分研磨，呈无颗粒的糊状。再将全部甘油加入，放入56℃温箱中2小时，然后加入甲醇，保存于茶色瓶中。一般两周后使用为好。J}s3 J
2．工作液XU;9:
临用时将贮备液与pH6.8的磷酸缓冲液按照1:20混合。J:bJ
(十三)埃利希(Ehrlich)苏木精染液)m.
苏木精 1.0gv>ID;
乙醇 50mlVu$p8@
醋酸 5mlid
甘油 50mlH>d%Z,
硫酸铝钾 5gQ{!&Vo
蒸馏水 50mlz),,x@
将苏木精溶于少量的乙醇中，再加醋酸并搅拌，以加速其溶解。当苏木精溶解后将甘油加入并摇动容器，同时加入其余的乙醇；硫酸铝钾需研磨并加热，然后溶解于蒸馏水中，将其一滴滴地加入上边的溶液，并不断摇动，此液配好后，将瓶口用纱布盖好，置通风处，经常摇动以加速其成熟，成熟约需4周左右，成熟的染液为深红色。y/Z
二、细胞化学和细胞组分分离溶液U
(一)M一缓冲液 HEpS:(
眯唑(Imidazole) 3.404g#n["{
KCI 3.7gF-)
MgCl2•6H2O 101.65mg2fi]_W
ECTA 380.35mg3:C&
EDTA 29.224mgaCm_(
巯基乙醇 0.07ml \6^?+
甘油 297mlGoMRuG
蒸馏水 加至1000ml1by{W
用lNHCl调pH至7.2室温保存。E_|
(二)2％Triton X一100溶液p[Qa\!
量取2mlTriton X一100(聚乙二醇辛基苯基醚)液，加M缓冲液98ml即可。QNU?m
（三）0.2％考马斯亮兰R-250染液P
甲醇 46.5ml:
醋酸 7.0mlMtG43*
考马斯亮兰 0.2g`
蒸馏水 加至100mlqg
(四)A．0.1％碱性固绿染液(pH8.0～8.5)|{
1．0.1％固绿水溶液SZt<
固绿(Fast green) 0.1g\h|B>
蒸馏水 100mls?]9^?
2．0.05％Na2C03溶液ESx
Na2C03 50mgt-[
蒸馏水 100ml-
用时按1:1体积混合即可。/Kfw,/
B．0.1％酸性固绿染液(pH2.2)K+`r
1．0.1％固绿水溶液。C;{pEr
2．mol／L×75盐酸液-F/c
盐酸(比重1.19)0.109ml加蒸馏水至100ml!Ivx
用时按l:1混合。\
(五)甲基绿一哌咯宁染液idw/\r
1.1mol／L醋酸缓冲液(pH4.8)：
刚果红 1gyd2)bL
蒸馏水 100mlN[9Y
(十六)Gomori硝酸铅作用液-*
0.05mol／L醋酸缓冲液(pH5) lOOml(&
0.6醋酸加蒸馏水200ml、取其 42ml7X-
醋酸钠1.36g加蒸馏水200ml，取其158ml共200ml v-w+D
B-甘油磷酸钠 2g#
醋酸铅 2gpH!P
5％氯化镁 5ml[
以上作用液在临用时配制，最终在pH5～5.2，过滤使用。f|8
(王世藩 汇编)vQz+
三、细胞培养和细胞融合溶液E
(一)0.01mol／LPBS(磷酸盐缓冲液Phosphate Buffer Saline，PBS)pH7.2。C5ia/v
0.2mol／L磷酸氢二钠液(甲液)： !o8!(t
NaH2PO4•12H2O 35.814g>:X9=\
双蒸水 加至500ml$
0.2mol／L磷酸二氢钠液(乙液):++XQs;
NaH2PO4•12H2O 15.601gpZ)
双蒸水 加至500ml)?U
取甲液36ml，乙液14ml和NaCl8.2克，加双蒸水至1000ml。混匀待完全溶解分装，经高压灭菌后保存于4℃冰箱备用。]IRhBS
(二)50％PEG(聚乙二醇Polyethyleneglycol mwl500)|4}B<
称取0.5克PEG，用前放入试管中在酒精灯火焰上熔化，加入等量37℃予热的MEM培养液，混匀，保温在37℃水浴中待用。9K$
(三)MEM培养液(含10％小牛血清)Zi`
MEM培养液(日本制药株式会社) 9.4ggXKl!
双蒸水 1000mle
NaHCO3 1.5g0\*
谷氨酰胺(L-glutamin) 0.292gc@
56℃灭活30分钟的小牛血清110mlv3_M7Y
MEM粉末加水溶解后，用NaHCO3调pH到7.1(因在抽滤过程中pH升高0.2～0.3)，然后加灭活的小牛血清和谷氨酰胺，待完全溶解后，立即用G6抽滤除菌，分装，置4℃冰箱保存备用。^F`
(四)0.25％胰蛋白酶一0.02％EDTA混合消化液c l
胰蛋白酶(Trypsin)粉 0.25g;(@w
EDTA粉 20.0mgUJ]V`
0.01mol／L PBS 100ml[!J_!`
先用少量PBS溶解胰蛋白酶，然后将EDTA粉末和剩下的液体加入混合，置37℃水浴中1小时左右(待彻底溶解，液体呈透明为止)，用G5抽滤，分装置4℃冰箱中保存。t?,